Bacillus sp. EBTA6 ile Proteaz Üretimi için Plackett–Burman Dizaynı Kullanılarak Besiyeri Bileşenlerinin Taranması ve Seçimi

Özet

Bu çalışmada, Plackett–Burman Dizaynı kullanılarak ev yapımı bir Tarhanadan izole edilen Bacillus sp. EBTA6‘nın proteaz üretimine besiyeri bileşenleri ve inokülüm miktarının etkisi araştırılmıştır. Yanıt olarak proteaz aktivitesinin belirlenmesi amacıyla çalkalamalı inkübatörde 24 saat geliştirilen bakterinin hücresiz süpernatantı kullanılmıştır. Toplam 11 faktör ile 12 farklı deneme gerçekleştirilmiş ve en yüksek deneysel proteaz aktivitesi 2280,4 U/mL olarak ölçülmüştür. Sonuçlar ANOVA ile istatistiki olarak analiz edilmiş ve en etkili faktörler %93,78; 2,19; 1,96; 1,31 katkı oranları ile sırasıyla maya özütü, dipotasyum fosfat, kazein ve pepton olarak tespit edilmiştir. Seçilen faktörlerin doğrulanması için dizayn denkleminden elde edilen maya özütü (9,98 g/L), dipotasyum fosfat (1,27 g/L), kazein (8,69 g/L) ve pepton (9,88 g/L) ile de bir deneme gerçekleştirilmiştir. Deneysel yanıt, tahmin edilen yanıttan yalnızca %5,5 yüksek olup 2411,4 U/mL olarak bulunmuş ve modelin uygulanabilir olduğunu göstermiştir.